Langkah-Langkah Khusus Untuk Mengekstrak Klorofil Melalui Pecahan Sel Menggunakan Penghancur Sel Ultrasonik
Feb 20, 2024
Penghancur sel ultrasonik menggunakan kesan penyebaran ultrasound dalam cecair untuk mencipta peronggaan, dengan itu memecahkan zarah pepejal atau tisu sel dalam cecair.
Perkembangan industri biologi telah meningkatkan keperluan untuk eksperimen menggunakan pulverizers sel ultrasonik, seperti mengukur dan mengawal suhu sampel, meningkatkan tahap kecerdasan sampel penyejukan suhu rendah dan keseluruhan mesin, dan sebagainya.
Langkah-langkah khusus untuk mengekstrak klorofil melalui penghancuran sel ultrasonik menggunakan penghancur sel ultrasonik:
1. Sentrifuge atau tapis sampel air dan pasang membran penapis gentian asetat pada penapis sedutan. Tuangkan jumlah kuantitatif sampel air untuk penapisan, dan tekanan negatif semasa penapisan tidak boleh terlalu tinggi (kira-kira 50kPa). Selepas sampel air diambil, teruskan melukis selama 1-2 minit untuk mengurangkan kelembapan pada membran penapis. Jika storan jangka pendek diperlukan selama 1-2 hari, ia boleh disimpan dalam peti sejuk biasa untuk dibekukan. Jika penyimpanan jangka panjang diperlukan (30 hari), ia hendaklah disimpan dalam peti sejuk bersuhu rendah (-20 darjah ).
2. Keluarkan membran penapis yang mengandungi fitoplankton dan keringkan pada suhu rendah di dalam peti sejuk selama 6-8 jam. Potong kecil-kecil dengan gunting dan masukkan ke dalam tiub empar 5ml atau 10ml. Tambah 3-4 ml aseton 90% untuk merendam serpihan di bawah paras cecair. Letakkan serpihan dalam bekas ultrasonik dan gunakan gelombang ultrasonik untuk memecahkan sel-sel sampel. (Membandingkan eksperimen pada masa dan frekuensi yang berbeza untuk memudahkan pengecaman * masa dan kekerapan pemecahan untuk kaedah bersatu).
3. Sentrifuge sampel yang tertakluk kepada pemecahan sel menggunakan ultrasound menggunakan emparan (3000-4000r/min) selama 10 minit. Tuangkan supernatan ke dalam kelalang volumetrik 5ml atau 10ml. Cairkan kepada 5ml atau 10ml dengan 90% aseton dan goncang dengan baik.
4. Letakkan supernatan pada spektrofotometer dan gunakan hidangan kolorimetrik laluan optik 1cm untuk membaca nilai penyerapan pada panjang gelombang 750nm, 663nm, 645nm dan 630nm, masing-masing. Gunakan 90% aseton sebagai ukuran penyerapan kosong untuk membetulkan penyerapan sampel.
